авторефераты диссертаций www.z-pdf.ru
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
 

1

На правах рукописи

ЗЕНКИНА ЕВГЕНИЯ ВИКТОРОВНА

ВОЗМОЖНОСТИ ИММУНОФЕРМЕНТНЫХ ТЕСТОВ

В АКТИВНОМ ВЫЯВЛЕНИИ КОЛОРЕКТАЛЬНОГО РАКА

Специальность 14.01.12 – онкология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Москва - 2015

2

Работа выполнена в Московском научно-исследовательском онкологическом

институте имени П.А. Герцена – филиале федерального государственного бюджетного

учреждения «Национальный медицинский исследовательский радиологический центр»

Министерства здравоохранения Российской Федерации (директор – член-корреспондент

РАН, доктор медицинских наук, профессор А.Д. Каприн)

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор Сергеева Наталья Сергеевна

Официальные оппоненты:

Фролов Сергей Алексеевич – доктор медицинских наук, лауреат Премии

Правительства РФ в области науки и техники, заместитель директора по научной работе

федерального государственного бюджетного учреждения «Государственный научный

центр колопроктологии имени А.Н. Рыжих» Министерства здравоохранения Российской

Федерации;

Боженко Владимир Константинович – доктор медицинских наук, профессор,

заслуженный

врач

России,

заведующий

отделом

молекулярной

биологии

и

экспериментальной терапии опухолей федерального государственного бюджетного

учреждения

«Российский

научный

центр

рентгенорадиологии»

Министерства

здравоохранения Российской Федерации.

Ведущая организация:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Российский

онкологический научный центр им. Н. Н. Блохина"

Защита диссертации состоится «

»

2015 г. в

часов на заседании

диссертационного совета

Д 208.047.02 на базе федерального государственного

бюджетного

учреждения

«Национальный

медицинский

исследовательский

радиологический центр» Министерства здравоохранения Российской Федерации по

адресу: 125284, Москва, 2-й Боткинский проезд, дом 3

С

диссертацией

можно

ознакомиться

в

библиотеке

Московского

научно-

исследовательского онкологического института имени П.А. Герцена – филиала

федерального государственного бюджетного учреждения «Национальный медицинский

исследовательский радиологический центр» Министерства здравоохранения Российской

Федерации (125284, г. Москва, 2-й Боткинский проезд, дом 3) и на сайте www.mnioi.ru

Автореферат разослан «

»

2015 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор биологических наук

Елена Романовна Немцова

3

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы

В структуре

заболеваемости злокачественными новообразованиями мужского

населения России рак ободочной кишки занимает 5-ое место, а рак прямой кишки – 6-е; а

женского - 4-ое и 7-е соответственно (А.Д. Каприн и соавт., 2014). Заболеваемость за

десятилетний период (2002-2012 гг) имеет выраженную тенденцию к увеличению: на

16,0% - для рака ободочной кишки и на 10,0% - для рака прямой кишки. Смертность за

2002-2012 гг также выросла - на 15,2%.

Очевидно, что выживаемость при

колоректальном раке (КРР) определяется стадией опухолевого процесса. В то же время,

среди впервые выявленных доля больных с 3-4 стадиями составляет сегодня более 60%

(А.Д. Каприн и соавт., 2014). Таким образом, на первый план выдвигается необходимость

разработки и внедрения в клиническую практику методологии выявления группы риска

развития и наличия этого патологического процесса.

Традиционным для раннего/активного выявления КРР является метод определения

скрытой крови в кале – гемокульттест (gFOBT – guaiac fecal occult-blood test), основанный

на гваяковой реакции или модернизированный Грегерсеном аналог гемокульттеста -

бензидиновая проба. Принцип анализа в этих биохимических тестах основан на оценке

псевдопероксидазной активности гемоглобина в кале. Значимость описанного подхода в

выявлении КРР подтверждена в нескольких

рандомизированных

контролируемых

скрининговых исследованиях (Faivre J. et al., 2004; Raginel T. et al., 2013). Однако ряд

авторов установили недостаточную чувствительность gFOBT (менее 30% для КРР и 15%

- для аденом) и много ложноположительных результатов, что в определенной мере

ограничивает его применение в клинике. Кроме того, метод считается «некомфортным»

для пациетов, т.к. требует ограничений в питании при подготовке к анализу, а при

получении положительного результата – 2-3-х кратного повторения.

Большой кластер исследований на пути создания программ активного выявления

КРР и предраковых заболеваний толстой и прямой кишки связан с эндоскопическими и

лучевыми методами (фиброколоноскопия, сигмоидоскопия,

ирригография с двойным

контрастированием), «виртуальная колоноскопия» с 2D- и 3D-моделированием (Röttgen R.

et al., 2003, Schoen R.E. et al., 2012).

_______________________________________________________________________

Список сокращений:

gFOBT – guaiac fecal occult-blood test, hHb – гемоглобин человека (h-human), Hp – гаптоглобин,

hHb/Hp – комплекс hHb с Hp, Q-FIT (iFOBT, FIT) - immunochemical fecal occult-blood test, fTu M2-PK -

опухолевая форма пируваткиназы М2-типа (f - fecal – исследуется в кале), ДУ – дискриминационный

уровень, ЖКТ – желудочно-кишечный тракт, КРР – колоректальный рак, НЯК – неспецифический язвенный

колит, РЖ – рак желудка, ЭТ – экспресс-тест.

4

Однако

проведение

систематических

обследований

населения

эндоскопическими

методами (как первый этап в активном выявлении КРР)

пока не представляется

возможным (и не только в России)

ввиду экономических соображений. Кроме того,

показано, что частота так называемых «интервальных» КРР – в течение года после такого

Pohl H. et al., 2013).

Параллельно на протяжении последних 20-ти лет не угасал интерес к разработке

более чувствительных и специфичных методов выявления скрытой крови и новых

опухолеассоциированных

маркеров

в

кале.

В

частности,

был

разработан

иммуноферментный метод (iFOBT - immunochemical fecal occult-blood test или FIT - fecal

immunochemical test) обнаружения в кале скрытой крови по гемоглобину человека (hНb),

лишѐнный основных недостатков традиционных биохимических методов. В частности,

данный метод не требует от пациента соблюдения предварительной диеты вследствие

использования в тесте специфических моноклональных антител к гемоглобину человека.

Далее был разработан иммуноферментный тест для выявления в кале комплекса

hНb с гаптоглобином (hHb/Hp). Гаптоглобин (Hp) – глобулин плазмы крови, с высокой

аффинностью

связывающий

свободный

гемоглобин

плазмы

крови

человека,

ингибирующий его окислительную активность и предотвращающий потерю железа

организмом через почки. Предполагается, что комплекс hHb/Hp (в отличие от hHb) более

устойчив к действию пищеварительных протеолитических ферментов и, следовательно,

ожидается, что он может выявлять гемоглобин при кровотечениях не только из нижних,

но и из верхних отделов ЖКТ (Schirrmacher S. et al, 2003).

Одним из новых маркеров, для которого был разработан иммуноферментный метод

выявления в кале, является димерная опухолевая форма пируваткиназы (PK - pyruvate

kinase) М2-типа – одного из ключевых ферментов гликолиза, интенсивность которого в

раковых клетках существенно выше, чем в нормальных (Eigenbrodt E. et al, 1998; Mazurek

S. et al., 2000). По данным исследований, проведѐнных в Германии, обнаружение в кале

повышенных количеств fTu М2-РК характерно для злокачественных новообразований

желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) (Hardt P.D. et al., 2003; Koss K. et al, 2008).

Таким образом, к настоящему моменту с одной стороны, очевидны перспективы

исследования ряда ферментов и метаболитов в кале с целью выявления группы риска

наличия КРР. А, с другой стороны, небольшое количество публикаций не позволяет пока

составить

представление

о

сравнении

диагностической

чувствительности

иммуноферментных копро-маркѐров для КРР, предраковых заболеваний и других

клинически значимых заболеваний ЖКТ. Это и обосновало цель и задачи настоящего

исследования.

обследования  лишь в 2 раза меньше, чем в общей популяции (Sanduleanu S. et al., 2012;

5

Цель

Сравнительное исследование диагностической значимости иммуноферментных

копро-тестов в выявлении группы риска наличия КРР и некоторых других заболеваний

органов пищеварительной системы, требующих дообследования.

Задачи исследования:

1.

Оценить и сравнить диагностическую чувствительность 5-ти новых копро-тестов:

теста, к комплексу гемоглобина человека с гаптоглобином (hHb/Hp) и к опухолевой

форме пируваткиназы М2-типа (fTu M2-PK)) в отношении колоректального рака.

2.

Исследовать диагностическую чувствительность 5-ти новых копро-тестов в

отношении других заболеваний органов ЖКТ (рака пищевода, рака желудка,

полипов толстой кишки и неспецифического язвенного колита).

3.

Оценить уровни иммуноферментных копро-маркѐров у условно здоровых лиц.

4.

Разработать концепцию использования новых иммуноферментных копро-тестов,

выявляющих

в кале hHb, hHb/Hp

и

fTu M2-PK при

злокачественных

новообразованиях органов ЖКТ и принципы интерпретации результатов.

Научная новизна

Впервые

параллельно

исследована

диагностическая

чувствительность

и

специфичность 5-ти копро-тестов: 3-х тест-систем, выявляющих в кале hHb, а также

hHb/Hp и fTu M2-PK у одних и тех же категорий больных со злокачественными

заболеваниями ЖКТ (колоректальный рак, рак пищевода и рак желудка), неопухолевыми

заболеваниями (неспецифический язвенный колит и полипы толстой кишки) и условно

здоровых лиц. Показана высокая диагностическая чувствительность 3-х тест-систем,

выявляющих в кале hHb, а также hHb/Hp и fTu M2-PK, в отношении колоректального

рака, рака желудка, неспецифического язвенного колита.

Установлено, что тест-системы для копро-маркѐров hHb/Hp и hHb (Q-FIT) в равной

мере дают возможность выявить кровотечение как из верхних, так и из нижних отделов

ЖКТ. Коэффициент корреляции Спирмена для этих 2-х маркеров равен 0,9, что

свидетельствует об их взаимозаменяемости и не позволяет с помощью этих двух тест-

систем дифференцировать кровотечения из верхних и из нижних отделов ЖКТ.

Установлено, тест-система для выявления гемоглобина человека в кале (Q-FIT)

регистрирует повышенное количество гемоглобина в равной мере при поздних (Т3, Т4) и

при ранних (Т1, Т2) стадиях КРР и рака желудка.

(с использованием антител к разным эпитопам гемоглобина человека (hHb)  3

6

Установлено, что сочетание копро-маркѐров - hHb (Q-FIT) и fTu M2-PK обладает

наивысшей диагностической чувствительностью в выявлении групп риска наличия КРР

(93,3%) и других клинически значимых заболеваний ЖКТ (рак желудка - 69,0%,

неспецифический язвенный колит - 78,6%).

Практическая значимость работы

По результатам исследования 5-ти тест-систем для 3-х копро-маркѐров у больных и

доноров, выбрано сочетание из 2-х копро-маркѐров: hHb (тест-система Q-FIT) и

опухолевая форма пируваткиназы (fTu M2-PK), для которых превышение ДУ хотя бы

одного из них свидетельствует о принадлежности обследуемого к группе риска наличия

клинически значимого патологического процесса в ЖКТ, включая КРР, рак пищевода, рак

желудка, неспецифический язвенный колит.

Публикации и апробация диссертации

Диссертация апробирована и рекомендована к защите 27 ноября 2014 г. на

межотделенческой конференции МНИОИ им. П.А. Герцена – филиала ФГБУ «ФМИЦ

имени П.А. Герцена» Министерства здравоохранения РФ. Результаты настоящего

исследования доложены на конкурсе молодых учѐных, в рамках VI Международной

конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность» (10-11 ноября 2009 г.,

Москва), на VII Научно-практической конференции с международным участием

«Молекулярная

медицина

и биобезопасность»

(27-28 октября

2010 г.), на VII

региональной конференции молодых учѐных-онкологов, посвящѐнной памяти академика

РАМН Н.В. Васильева «Актуальные вопросы экспериментальной и клинической

онкологии» (27 апреля 2012 года, г. Томск). По теме диссертации опубликовано 2 статьи в

журналах, рекомендованных ВАК РФ и 10 тезисов докладов, издано 1 пособие для врачей.

Структура и объѐм диссертации

Диссертация изложена на 139 страницах машинописного текста, состоит из

следующих разделов: «Введение», «Обзор литературы», «Материалы и методы»,

«Результаты собственных исследований и их обсуждение», «Заключение», «Выводы»,

«Список литературы». Глава «Список литературы» содержит 151 источник, из которых 26

отечественных и 125 зарубежных. Работа иллюстрирована 13 рисунками и 43 таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

Общая характеристика больных. В исследование включены 486 человек (45,6% -

мужчины и 54,4% - женщины): 91 условно здоровый человек и 395 первичных больных с

заболеваниями ЖКТ (180 больных КРР, 121 больной раком желудка (РЖ) и 10 больных

раком пищевода (РП), 64 пациентов с неспецифическим язвенным колитом (НЯК) и 20

пациентов – с полипами толстой кишки (ПТК)), находившихся на обследовании и

7

последующем лечении в МНИОИ им. П.А. Герцена МЗ РФ, ФГБУ "ГНЦК им. А.Н.

Рыжих" МЗ РФ и поликлинике МГОБ №62 (Онкологическом диспансере №2).

Диагноз у пациентов был установлен на основании данных комплексного

обследования. Стадия опухолевого заболевания у онкологических пациентов установлена

по системе рTNM в 6-ой редакции (2002г.)

Больные КРР составили целевую группу исследования, больные РЖ и РП, а также

больные НЯК и ПТК сформированы как группы сравнения. Среди больных КРР 11,1%

случаев приходилось на I стадию, 27,2% - на II, 47,2% - на III и 14,5% - на IV стадию

заболевания. Доля больных РЖ с I стадией составила 21,5%, II – 16,5%, III – 24,8% и IV -

37,2%. В группу НЯК (64 человека) вошли пациенты с острым течением процесса (ОЯК)

– 13 случаев (20,3%) и хроническим (ХЯК) – 51 случай (79,7%).

В 90% случаев у

пациентов с ПТК были выявлены единичные полипы, и лишь в 10% – множественне.

Сбор и подготовка образцов для исследования.

Объектом

исследования

служил

кал

первичных

больных

(до

инвазивных

диагностических процедур) и условно здоровых лиц. Обследуемые собирали и

маркировали образцы кала (~20 мл) в полипропиленовые контейнеры (объѐмом 40 мл) и

доставляли в лабораторию Прогноза эффективности консервативного лечения. В

лаборатории осуществляли забор проб кала для каждого из 5 тестов в необходимом

количестве в пробирки, содержащие экстрагирующий буфер. Оставшиеся образцы

хранили при -70 °C.

В работе использован ряд иммунохимических методов исследования.

Мембранный иммунохроматографический качественный (Qualitative FIT) экспресс-

тест (ЭТ) для одноэтапного качественного определения скрытой фекальной крови ACON

Biotech (Hangzhou) Co., Ltd, КНР. Данный метод позволяет выявить скрытую фекальную

кровь в количестве 50 нг Hb/мл кала и более, что по чувствительности превосходит

традиционные гваяковые тесты.

Количественный иммуноферментный тест (Quantitative FIT, здесь и далее для

удобства – Q-FIT) для выявления гемоглобина человека в кале (hHb) на основе тест-

системы «Hemoglobin ELISA Kit» Immundiagnostik AG, Германия. Метод основан на

«сэндвич» технологии с применением специфичных антител к hHb. Дискриминационный

уровень (ДУ) – 2,0 мкг/мл.

Количественный иммуноферментный тест для выявления комплекса гемоглобин-

гаптоглобин человека в кале (hHb/Hp) на основе тест-системы «Hemoglobin/Haptoglobin-

Complex ELISA Kit» фирмы Immundiagnostik AG, Германия. Этот метод, как и

предыдущий, основан на «сэндвич» технологии с использованием высокоаффинных

антител к гаптоглобину. ДУ – 0,5 мкг/мл.

8

Для количественного определения опухолевой формы пируват-киназы М2-типа (f Tu

M2-PK) в образцах кала, как и предыдущих двух тестах, использовалась методика,

основанная на твердофазном ИФА и «сэндвич» технологии с использованием

моноклональных антител, специфичных к Tu M2-PK. ДУ – 4,0 ед/мл.

Метод латексной агглютинации для количественного измерения уровня hHb в кале

(Quantitative FIT- здесь и далее для удобства - FOB Gold). Для выполнения анализа

использовали автоматический иммунологический анализатор фирмы «Sentinel» (Италия).

ДУ – 0,1 мкг/мл.

Методы статистической обработки данных.

С использованием программы Microsoft Excel 2010 создана база данных для

хранения всей информации по лицам, включѐнным в исследование и документированным

результатам лабораторных тестов, а также результатов клинического обследования.

Для

статистической

характеристики

использовали

базовые

статистические

показатели – среднее значение, медиана, стандартное отклонение (σ), интерквартильный

размах (р25-р75). Ошибку среднего арифметического (m) рассчитывали по формуле:

m=σ/√n. Для сравнения групп по качественным показателям применяли 2-критерий

согласия Пирсона; для сравнения распределения количественных величин в группах -

парный t-критерий Стьюдента или непараметрический U-критерий Манна-Уитни (U-тест);

для оценки корреляционных отношений – ранговый тест корреляции Спирмена.

Математический обсчет результатов и статистическую обработку данных проводили с

использованием программ Primer of Biostatistics 4.03, Statistica 6.0. и Microsoft Excel 2010.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Результаты исследования гемоглобина человека (hHb) в кале с помощью

количественных Q-FIT и FOB Gold методов и качественного экспресс-теста (ЭТ).

Содержание hHb в кале больных и условно здоровых лиц, оценено с использованием

теста Q-FIT, представлено в таблице 1. Повышенные уровни hHb в кале (скрытые

кровотечения) выявлены методом Q-FIT при КРР и ОЯК в сходном проценте случаев

~90%. При РЖ этот маркѐр оказался положительным в половине случаев, а при полипах

толстой кишки – лишь у каждого пятого больного (табл.1). Более чем в 80% случаев при

КРР и НЯК в стадии обострения, а также почти в половине случаев при хроническом НЯК

уровень hHb в кале более чем в 10 раз превышал верхнюю границу нормы (2,0 мкг/мл) -

рис. 1. Повышенные значения показателя, соответствующие диапазону 2,0 - 20 мкг/мл, а

также значения показателя в пределах нормы при данных заболеваниях встречались

только в единичных случаях. В то же время, более чем в 80% случаев при РП или полипах

85

0,4-3,1

0,8±0,1

0,4

0,4-0,8

-

х лиц

(мкг/мл)

m (мкг/мл)

Уровень значимости отличий от группы условно здоровых лиц по критерию Манна-Уитни (р1) и 2-

критерию Пирсона (р2). *Отличия статистически достоверны. Дискриминационный уровень - 2,0 мкг/мл.

Рис. 1.

Распределение случаев по уровню hHb в кале, выявленному методом Q-FIT, в

соответствующих группах пациентов и здоровых лиц

Здоровые

лица

Первичный

КРР

острое

течение

(ОЯК)

хрониче

ское

течение

(ХЯК)

Полипы

кишечника

Рак желудка

Рак пищевода

0,4-45,8

4,3±2,4

9

кишки, а также у 95% здоровых людей, концентрации hHb в кале не превышали ДУ.

Распределение больных РЖ по уровням hHb «заняло» промежуточное положение (рис. 1).

Таблица 1

Концентрации hHb в кале, измеренные методом Q-FIT, в разных группах обследованных

лиц

р1

р2

-

0,001*

0,001*

0,001*

0,064

0,001*

0,332

Группы

обследованны

n

Диапазон

Среднее

значений

значение±

Медиана

р25-р75

(мкг/мл)

(мкг/мл)

Доля

случаев

превыше-

ния ДУ, %

4,7%

(4/85)

89,5%

(136/152)

92,3%

(12/13)

75,5%

(37/49)

20,0%

(4/20)

50,4%

(61/121)

20,0%

(2/10)

121

0,4-3582,0

78,7± 40,7

10

0,4-2,7

1,2±0,3

694,4± 281,3

383,2± 109,1

152

13

49

20

0,4-3284,0

0,4-3039,0

1,1-3461,0

317,1± 56,8

40,0

20,7-152,0

33,8-991,2

0,001*

0,001*

0,001*

0,062

0,001*

0,128

140,6

33,0

2,3- 209,0

0,6

0,4-0,6

2,0

0,4-8,7

1,0

0,4-1,4

10

По всем показателям, характеризующим содержание hHb в кале при КРР – средней

концентрации, медиане и диапазонам значений этого показателя - группы Т1, Т2, Т3 и Т4

между собой не различались (р0,05). Обращает на себя внимание то, что у ряда больных

КРР уже при Т1-2 крайне высокие значения концентраций hHb в кале, превышающих ДУ

в десятки и сотни раз (табл. 2). В целом полученные данные свидетельствуют о высокой

чувствительности иммуноферментного теста (Q-FIT) для выявления hHb (скрытой крови)

в кале даже при распространѐнности опухоли в пределах собственной мышечной стенки.

Таблица 2

Уровень hHb (Q-FIT) у больных КРР в зависимости от глубины инвазии первичной

опухоли (Т по системе классификации TNM)

р1

-

-

0,625

0,754

р2

Глубина

инвазии

опухоли

(Т)

Всего

Т1-2

Т3

Т4

n

152

20

110

22

Диапазон

значений

Среднее

Медиана

р25-р75

(мкг/мл)

Доля случаев

превышения ДУ

%

(мкг/мл)

значение±

(мкг/мл)

m (мкг/мл)

0,4-3284,0

317,1 ±56,8

40,0

20,7-152,0

0,4-3189,0

320,8±167,9

39,5

23,4-253,1

0,4-3209,0

311,2±65,8

40,0

16,5-120,0

0,4-3284,0

343,3±157,8

40,0

30,5-180,5

89,5% (136/152)

-

95,0% (19/20)

-

88,2% (97/110)

0,608

90,9% (20/22)

0,932

Уровень значимости отличий от группы случаев Т1-2 по критерию Манна-Уитни (р1) и 2-критерию

Пирсона (р2). Дискриминационный уровень - 2,0 мкг/мл.

Таблица 3

Уровни hHb (Q-FIT) у больных РЖ в зависимости от глубины инвазии первичной опухоли

(Т)

Стадия

n

Диапазон

Среднее

Медиана

р25-р75

р1

Доля случаев

р2

заболев

значений

значение

(мкг/мл)

(мкг/мл)

превышения

ания

(мкг/мл)

±m

ДУ, %

(мкг/мл)

121

0,4-3582,0

78,7±40,7

2,0

0,4-8,7

50,4%

(61/121)

1,3

0,4-2,5

-

31,6%(6/19)

-

2,5

0,4-5,9

0,274

52,2%(12/23)

0,303

3,0

0,6-13,4

0,077

54,4%(43/79)

0,125

Всего

Т1

Т2

Т3-4

19

23

79

0,4-54,5

4,8±2,8

0,4-3582,0

160,1±155,5

0,4-2935,0

72,8±48,2

Уровень значимости отличий от группы Т1 по критерию Манна-Уитни (р1) и 2-критерию Пирсона (р2).

Дискриминационный уровень - 2,0 мкг/мл.

,

р1

р2

Группы

обследованн

ых лиц

Здоровые

лица

Первичный

КРР

Рак желудка

n

17

22

38

Диапазон

Среднее

значений

значение±

(х 10-3

m (х 10-3

мкг/мл)

мкг/мл)

11

При РЖ медиана концентраций hHb в кале увеличивалось с увеличением параметра

Т (табл. 3). Обращает на себя внимание и то, что в случаях Т2 и Т3-4 выявлены наиболее

широкие диапазоны значений копро-hHb (Q-FIT): от 0,4 мкг/мл до экстремально высоких

(3582,0 мкг/мл) у нескольких больных РЖ, то есть таких же значений, как при КРР.

Наблюдалась тенденция к увеличению доли случаев, в которых уровень hHb превышал

ДУ, с увеличением параметра Т: 31,6% →52,2% →54,4%

при Т1, Т2, Т3-4,

соответственно. Однако отличия между соответствующими группами были статистически

недостоверными (р0,05).

Таким образом, иммуноферментный тест (Q-FIT)

для выявления hHb в кале

является адекватным для выявления скрытых кровотечений из верхних и нижних отделов

ЖКТ при КРР, РЖ и НЯК и обладает достаточно высокой специфичностью - 95,3%

относительно условно здоровых лиц.

Для ряда больных КРР, РЖ и здоровых лиц из общей выборки были дополнительно

исследованы

уровни

hHb

с

помощью

количественного

автоматизированного

турбидиметрического иммунохимического

FOB Gold выявила повышенные уровни hHb в кале у этих же пациентов в меньшем

количестве случаев: при КРР в 63,6% и лишь в 18,4% при РЖ (табл. 4).

Таблица 4

Содержание hHb в кале для разных групп обследованных по результатам теста FOB Gold

Доля случаев

превышения

ДУ, %

14,0-19,0

14,0±0,3

14,0

14,0-14,0

-

0%

(0/17)

-

469,2,2±

294,6

168,0±

100,0

14,0-6449,0

14,0-3655,0

156,2

17,6-899,5

0,001*

63,6% (14/22)

0,001*

14,0

14,0-26,9

0,058

18,4% (7/38)

0,145

Уровень значимости отличий от группы условно здоровых лиц по критерию Манна-Уитни (р1) и 2-

критерию Пирсона (р2). *Отличия статистически достоверны. Дискриминационный уровень - 0,1 мкг/мл.

Результаты ещѐ одного – качественного - иммунохроматографического экспресс-

теста (ЭТ), выявляющего hHb в кале, в разных группах пациентов и здоровых лиц,

свидетельствуют о сравнительно высокой чувствительности метода при кровотечениях из

нижних отделов ЖКТ (например, при КРР (78,3%) и НЯК (71,4%) и более низкой при РЖ

(12,0%) - таблица 5.

Медиана

р25-р75

(х 10-3

(х 10-3

мкг/мл)

мкг/мл)

метода (FOB Gold)  табл.4. Тест-система

Группы

n

Доля положительных

случаев

0% (0/40)

78,3% (47/60)

71,4% (20/28)

40

60

28

Здоровые лица

КРР

Неспецифический язвенный колит, в т.ч.:

ОЯК

ХЯК

Рак желудка

6

83,3% (5/6)

22

68,2% (15/22)

100

12,0% (12/100)

Сравнение диагностической чувствительности и специфичности трѐх тест-систем,

выявляющих hHb в кале (табл. 6) свидетельствуют о том, что наибольшей

диагностической чувствительностью в отношении выявления повышенных уровненй hHb

при КРР обладал тест Q-FIT (89,5%).

Таблица 6

Сравнение диагностической чувствительности трѐх тест-систем, выявляющих hHb в

кале

Тест-системы

Q-FIT

FOB Gold

ЭТ

12

Таблица 5

Результаты ЭТ, выявляющего скрытую кровь в кале

Группы

обследовнных

Здоровые лица

КРР

Рак желудка

n

Доля случаев

n

Доля случаев

n

Положи-

превышения ДУ,

превышения ДУ,

тельный

%

%

85

4,7%(4/85)

152

89,5%(136/152)

р10,001*

121

50,4% (61/121)

р10,001*

17

0%(0/17)

22

63,6%(14/22)

р10,001*

р20,003*

38

18,4%(7/38)

р1=0,145

р2=0,001*

40

0%(0/40)

60

78,3% (47/60)

р10,001*

р20,057

100

12,0% (12/100)

р1=0,05

р20,001*

Уровень значимости отличий от группы условно здоровых лиц (р1) и от результатов, полученных с

использованием теста Q-FIT (р2) по 2-критерию Пирсона. *Отличия статистически достоверны.

Меньшей

чувствительностью в отношении КРР обладал ЭТ (78,3%), при этом

практически не выявляя РЖ (88,0% отрицательных результатов) и в 100% оставаясь

отрицательным у здоровых лиц.

FOB Gold выявил наименьшее (63,6%) количество

положительных случаев hHb при КРР по сравнению с другими тестами, но показал

несколько выше результат при РЖ, чем ЭТ, при сходной специфичности (табл. 6).

85

0,1-1,2

0,1±0,1

0,1

0,1-0,1

-

лиц

(мкг/мл)

Уровень значимости отличий от группы условно здоровых лиц по критерию Манна-Уитни (р1) и 2-

критерию Пирсона (р2). *Отличия статистически достоверны. Дискриминационный уровень - 0,5 мкг/мл.

В целом, доля превышения hHb/Hp верхней границы нормы в группах КРР и НЯК

была сравнима и достаточно высока: 87,9% - при КРР, 84,6% - при ОЯК и 68,6% - при

ХЯК, что с высокой долей вероятности позволяет с помощью этого теста заподозрить

13

2. Результаты исследования комплекса гемоглобина человека с гаптоглобином

(hHb/Hp) в кале с помощью количественного иммуноферментного теста

Согласно рекомендации производителя тест-системы, выявляющей комплекс

hHb/Hp, величина верхней границы нормы равна 2,0 мкг/мл. Однако на этапе обработки

данных нами было установлено, что оптимальным значением ДУ для комплекса hHb/Hp

целесообразно признать 0,5 мкг/мл, при котором для КРР достигается чувствительность

88,0% при сохранении высокой (97,6%) специфичности относительно здоровых лиц. Это

значение и было использовано при дальнейшем анализе данных.

Результаты выявления комплекса hHb/Hp в кале разных групп обследованных лиц

(табл. 7) свидетельствуют о высокой специфичности hHb/Hp относительно здоровых лиц

– 97,6%

Таблица 7

Концентрации hHb/Hp в кале в разных группах обследованных лиц

р1

р2

-

-

0,001*

0,001*

0,001*

0,012*

0,001*

0,725

Среднее±m

Медиана

р25-р75

(мкг/мл)

(мкг/мл)

(мкг/мл)

Группы

обследованных

n

Диапазон

значений

Доля

случаев

превыше

ния ДУ,

%

2,4%

(2/85)

87,9%

(138/157)

84,6%

(11/13)

68,6%

(35/51)

20,0%

(4/20)

43,8%

(53/121)

10,0%

(1/10)

Здоровые лица

Первичный КРР

острое

течение

(ОЯК)

хроничес-

кое

течение

(ХЯК)

Полипы

кишечника

Рак желудка

Рак пищевода

157

0,1-3043,0

96,4±26,6

13

0,1-2682,0

406,6±246,7

51

0,1-2210,0

183,7±64,0

20

0,1-12,5

0,9±0,6

121

0,1-42,6

3,2±0,7

10

0,1-6,7

0,8±0,6

13,3

2,5-40,0

14,6

0,8-35,4

7,8

0,2-40,0

0,1

0,1-0,2

0,3

0,1-1,4

0,1

0,1-0,2

0,001*

0,001*

0,001*

0,072

0,001*

0,019*

р1

-

-

0,866

0,733

р2

-

-

0,507

0,704

Глубина

инвазии

опухоли

(Т)

Всего

Т1-2

Т3

Т4

n

Диапазон

значений

Среднее

Медиана

р25-р75

(мкг/мл

)

2,5-40,0

4,1-33,8

2,1-39,1

3,0-40,0

Доля

случаев

превыше-

ния ДУ, %

87,9%

(138/157)

95,0%

(19/20)

86,8%

(99/114)

87,0%

(20/23)

(мкг/мл)

13,3

6,1

13,7

15,7

14

наличие патологических процессов в толстой кишке, но дифференцировать эти процессы

друг от друга на основании уровней маркѐра не представляется возможным.

Изучение этого маркѐра при РЖ и РП было важно в аспекте предположения ряда

авторов о том, что изменение конформации молекулы hHb в комплексе с Hp, например,

при кровотечениях из опухолей

пищевода или желудка, может обеспечивать

«беспрепятственное прохождение» комплекса по ЖКТ и его можно будет обнаружить в

кале таких больных, что позволит при лабораторном обследовании выявить и различить

группы риска наличия клинически значимых заболеваний не только нижних, но и верхних

отделов ЖКТ. В ходе работы было выявлено, что в целом данные об уровнях комплекса

hHb/Hp и hHb в кале при РЖ оказались сходными и близкими (табл. 1 vs табл. 7). Это

свидетельствует о том, что эпитоп, выявляемый антителами к самому hHb и к hHb в

комплексе с гаптоглобином, сходно доступен для обнаружения в кале больных РЖ.

Далее был проведѐн анализ данных об уровнях hHb/Hp, в сопоставлении с глубиной

инвазии первичной опухоли при КРР (табл. 8). В целом, группы Т3 иТ4 имели

существенно более широкие диапазоны значений hHb/Hp: от крайне низких (на пределе

чувствительности метода) до экстремально высоких (превышающих ДУ более, чем в 3000

раз), чем при Т1-2. Выявлены высокие, сходные и достоверно не различающиеся между

собой доли значений, превышающих ДУ при Т1-Т4, составляющие 86,8 - 95,0% (табл. 8).

Средние значения и медианы hHb/Hp возрастали с увеличением глубины инвазии. Однако

достоверных различий по всем параметрам, высчитанным для hHb/Hp, между КРР с

разной степенью инвазии выявлено не было (р0,05).

Таблица 8

Уровни hHb/Hp в кале у больных КРР при различной степени инвазии первичной опухоли

(параметр Т по системе классификации TNM)

(мкг/мл)

m (мкг/мл)

157

0,1-3043,0

20

0,1-398,0

114

0,1-1619,0

23

0,1-3043,0

96,4±26,6

64,1±25,7

81,0±24,6

200,8±132,7

2

Уровень значимости отличий от группы Т1-2 по критерию Манна-Уитни (р1) и критерию Пирсона-

– тест (р2). Дискриминационный уровень - 0,5 мкг/мл.

значение±

р1

-

-

0,081

0,040*

р2

-

Глубина

инвазии

первичной

опухоли (Т)

Всего

Т0-1

Т2

Т3

Т4

n

121

19

23

71

Диапазон

значений

Среднее

Медиана

р25-р75

(мкг/мл)

Доляслучаев

превышения

ДУ, %

43,8%

(53/121)

21,1% (4/19)

-

(мкг/мл)

значение±

(мкг/мл)

m (мкг/мл)

0,1-42,6

3,2±0,7

0,1-10,4

0,8±0,5

0,1-42,6

4,7±2,4

0,1-34,2

3,7±0,9

0,3

0,1-1,4

0,1

0,1-0,6

0,6

0,1-0,6

0,4

0,2-4,9

0,2

0,1-1,6

15

Сходные данные были получены при РЖ. Так, при любой степени инвазии РЖ

(параметр Т) были также отмечены как нормальные, так и превышающие ДУ в несколько

раз значения маркѐра (табл. 9). Доля случаев превышения ДУ для комплекса hHb/Hp

находилась в диапазоне 21,1% (при Т0-1) – 52,2% (при Т2), однако различия между

группами были статистически недостоверными.

Таблица 9

Уровни hHb/Hp в кале у больных РЖ при различной глубине инвазии первичной опухоли

(Т)

52,2% (12/23)

49,3% (35/71)

0,080

0,052

0,778

8

0,1-1,6

0,4±0,2

0,933

25,0% (2/8)

Уровень значимости отличий от группы Т0-1 по критерию Манна-Уитни (р1) и 2-критерию Пирсона (р2).

*Отличия статистически достоверны. Дискриминационный уровень - 0,5 мкг/мл.

3. Результаты исследования fTu M2-PK с помощью количественного

иммуноферментного теста

Данные о содержании fTu M2-PK у больных и здоровых лиц систематизированы в

таблице 10. Показано, что диагностическая чувствительность fTu M2-PK при КРР

достаточно высока и составляет около 80%, при НЯК – несколько ниже - 68,3%. При РЖ и

РП этот маркѐр оказался положительным в половине случаев, а при полипах толстой

кишки – у каждого четвѐртого больного (табл. 10).

Средние уровни fTu M2-PK при глубине инвазии опухоли, соответствующей Т3

(86,9±17,2 ед/мл) и Т4 (93,9±39,3 ед/мл) были вдвое выше такового при Т1-2 (44,3±24,1

ед/мл) и превышали ДУ более, чем в 20 раз. При всех стадиях КРР наблюдались как

крайне низкие, так и очень высокие концентрации маркѐра, причѐм при Т3 и Т4 значений,

превышающих ДУ в 5-20 раз было в 2 раза больше, чем при Т1-2. Различия в доле

случаев превышения ДУ при Т1-2 и Т3 оказались недостоверными (табл. 11), также, как и

чувствительность этого теста при поражении правых и левых отделов толстой кишки.

Уровень значимости отличий от группы Т1-2 по критерию Манна-Уитни (р1) и 2-критерию Пирсона (р2).

Дискриминационный уровень - 4,0 ед/мл.

93,9±39,3

9,0

16

Таблица 10

Содержание fTu M2-PK в кале в разных группах обследованных

р1

р2

-

n

Диапазон

значений

Среднее

значение

±m

(ед/мл)

Медиана

р25-р75

(ед/мл)

(ед/мл)

Доля

случаев

превыше

ния ДУ,

%

Группы

обследованных

лиц

(ед/мл)

Здоровые лица

Первичный

КРР

острое

течение

(ОЯК)

хрониче

ское

течение

(ХЯК)

Полипы

кишечника

Рак желудка

Рак пищевода

75

1,0-5,9

1,5±0,1

1,0

1,0-1,3

-

5,3%

-

(4/75)

144

13

50

20

1,0-780,0

81,9±14,0

1,0-825,0

186,4±80,8

1,0-2000,0

199,2±53,9

1,0-19,8

3,9±1,2

14,4

20,0

17,9

1,2

4,1

3,8

4,7-39,3

14,6-

168,2

1,8-

185,9

79,2%

(114/144)

84,6%

(11/13)

64,0%

(32/50)

0,001*

0,001*

0,001*

0,001*

0,001*

0,001*

0,001*

0,001*

1,0-4,1

0,026*

25,0%

0,025*

(5/20)

121

1,0-465,0

19,5±5,4

10

1,0-11,7

4,8±1,0

1,0-10,3

2,4-6,7

51,2%

62/121

50,0%

(5/10)

0,001*

0,001*

Уровень значимости отличий от группы условно здоровых лиц по критерию Манна-Уитни (р1) и 2-

критерию Пирсона (р2). *Отличия статистически достоверны. Дискриминационный уровень - 4,0 ед/мл.

Таблица 11

Содержание fTu M2-PK в кале больных КРР при различной степени инвазии первичной

опухоли (параметр Т по системе классификации TNM)

р1

-

-

0,461

0,966

р2

-

-

0,910

0,417

Глубина

инвазии

первичной

опухоли

(Т)

Всего

Т1-2

Т3

Т4

n

144

20

105

19

Диапазон

значений

(ед/мл)

1,0-780,3

1,0-490,0

1,0-780,3

1,0-575,5

Среднее

значение±m

(ед/мл)

81,9±14,0

44,3±24,1

86,9±17,2

Медиана

(ед/мл)

14,4

15,4

14,2

р25-р75

(ед/мл)

4,7-39,3

5,7-20,6

5,7-39,3

1,8-51,9

Доля случаев

превышения

ДУ, %

79,2%

(114/144)

80,0%

(16/20)

81,9%

(86/105)

63,2%

(12/19)

р1

р2

Глубина

инвазии

Всего

Т0-1

Т2

Т3

Т4

р25-р75

(ед/мл)

n

121

19

23

71

Диапазон

Среднее

Медиан

значений

значение±

а

(ед/мл)

m (ед/мл)

(ед/мл)

Доля случаев

превышения

ДУ, %

1,0-465,0

19,5±5,4

1,0-465,0

46,2±28,7

1,0-95,0

8,7±4,1

1,0-211,0

17,4±4,7

4,1

2,2

2,0

4,7

3,1

1,0-10,3

-

1,0-10,9

-

1,0-7,5

0,864

1,0-11,6

0,336

1,0-6,3

0,978

51,2% (62/121)

-

36,8% (7/19)

-

43,5% (10/23)

0,904

57,7% (41/71)

0,173

50,0% (4/8)

0,836

17

Сходный анализ fTu M2-PK был проведѐн для РЖ (табл. 12).

Таблица 12

Содержание fTu M2-PK в кале больных РЖ при различной глубине инвазии первичной

опухоли (параметр Т по системе классификации TNM)

8

1,0-19,1

5,3±2,2

Уровень значимости отличий от группы Т0-1 по критерию Манна-Уитни (р1) и 2- критерию Пирсона

(р2). Дискриминационный уровень - 4,0 ед/мл.

Доля случаев превышения ДУ возрастала с увеличением параметра Т: при Т0-1 –

36,8% случаев, при Т2 - 43,5%, Т3 – 57,7%, при Т4 – 50,0%, в среднем составляя 51,2%

(табл. 12). Аналогичная тенденция прослеживалась и для медианы fTu M2-PK. Однако

отличия между группами статистически недостоверны (р0,05; табл.12).

В целом же полученные данные свидетельствуют о высокой чувствительности

иммуноферментного теста для выявления fTu M2-PK уже при начальных стадиях

поражения кишки КРР и несколько меньшей – при РЖ. Следовательно, выявление

высоких концентраций fTu M2-PK в кале может быть использовано для формирования

группы риска наличия злокачественных новообразований, локализующихся в разных

отделах ЖКТ.

4. Сравнение диагностической чувствительности и специфичности разных копро-

маркѐров, включѐнных в исследование

В таблице 13 представлены сводные результаты оценки доли случаев повышения

маркеров во всех обследованных группах. Очевидно, что Q-FIT, выявляющий в кале

гемоглобин человека, и hHb/Hp, выявляющий комплекс

гемоглобина человека с

гаптоглобином, обладают сходной диагностической чувствительностью у всех категорий

больных с заболеваниями, локализующимися как в верхних, так и в нижних отделах ЖКТ.

Однако чувствительность тест-системы hHb/Hp несколько ниже у всех категорий

обследованных (табл. 13).

18

Таблица 13

Доли случаев превышения ДУ для разных копро-маркѐров в группах обследованных

пациентов и у здоровых лиц

Копрологический маркер

Q-FIT

hHb/Hp

fTuM2-PK

FOB Gold

(2,0 мкг/мл)

(0,5 мкг/мл)

(4,0 ед/мл)

(0,1 мкг/мл)

Группы

обследованных

Здоровые лица

КРР

Неспецифический

язвенный колит, в

т.ч.:

ОЯК

ХЯК

Полипы кишки

Рак желудка

Рак пищевода

Всего выполнено

тестов

ЭТ

4,7%(4/85)

2,4 %(2/85)

5,3%(4/75)

0%(0/17)

0%(0/40)

89,5%(136/152)

87,9%(138/157)

79,2%(114/144)

63,6% (14/22)

78,3%(47/60)

71,4%(20/28)

83,3%(5/6)

68,2%(15/22)

0%(0/2)

79,0%(49/62)

71,9%(46/64)

68,3% (43/63)

92,3%(12/13)

84,6%(11/13)

84,6% (11/13)

75,5%(37/49)

68,6%(35/51)

64,0% (32/50)

20,0%(4/20)

15,0%(3/20)

25,0% (5/20)

-

-

-

-

51,2%(62/121)

43,8%(53/121)

51,2% (62/121)

18,4%(7/38)

12,0%(12/100)

20,0%(2/10)

10,0% (1/10)

50,0%(5/10)

0%(0/3)

0%(0/3)

450

457

433

80

233

Предположение ряда авторов о том, что hHb/Hp будет иметь преимущество над hHb

(Q-FIT) в диагностической чувствительности в отношении выявления скрытых

кровотечений при заболеваниях верхних отделов ЖКТ (РЖ и РП) не нашло

подтверждения. Об этом свидетельствуют как данные, приведѐнные в таблице 13, так и

прямое сопоставление показателей этих копро-маркѐров при КРР (рис. 2).

Колоректальный рак

10000000

1000000

100000

10000

1000

100

10

1

1

100

10000

1000000

100000000

hHb (Q-FIT), мкг/мл

Рис. 2. Соотношение уровней hHb (Q-FIT) и комплекса hHb/Hp в кале при КРР

Q-FIT

fTuM2-PK

Q-FIT +fTuM2-PK

хотя бы 1 из 2 маркѐров

повышен

88,3±3,0%

80,3±5,1%

49,0±5,0%

2,9±1,7%

(106/120)

(49/61)

(49/100)

(2/69)

79,2±3,7%

67,2±6,0%

49,0±5,0%

5,8±2,9%

(95/120)

(41/61)

(49/100)

(4/69)

р=0,080

р=0,150

р=0,888

р=0,676

95,0±2,0%

83,6±4,7%

69,0±4,6%

8,7±3,4%

(114/120)

(51/61)

(69/100)

(6/69)

р=0,102

р=0,814

р=0,006*

р=0,274

19

Коэффициент ранговой корреляции Спирмена для этих маркѐров при КРР составил

0,9. Сходные данные были получены для этих двух маркѐров при РЖ и НЯК. Таким

образом, эти маркѐры представляются не дополняющими, а взаимозаменяющими, с

небольшим преимуществом Q-FIT.

Преимущества

теста

Q-FIT

в

диагностической

чувствительности

были

подтверждены в ходе прямого сопоставления доли случаев превышения ДУ трѐх тестов

выявляющих hHb у одних и тех же больных КРР, РЖ и здоровых лиц.

Таблица 14

Доля случаев превышения показателем ДУ при использовании тестов Q-FIT и fTuM2-PK у

одних и тех же групп больных и у здоровых лиц

Клинические группы

КРР

Несп. язв.

Рак желудка

Здоровые

колит

лица

(n=120)

(n=61)

(n=100)

(n=69)

Копро-маркѐры

Уровень значимости отличий от теста Q-FIT по 2-критерию Пирсона. *Отличия статистически достоверны.

На следующем этапе мы сравнили по диагностической чувствительности и

специфичности Q-FIT с fTu M2-PK, т.е. с маркѐром, не связанным с hHb в кале, но

ассоциированным с развитием злокачественного новообразования в ЖКТ. Очевидно, что

если за положительный результат принять повышение хотя бы одного из этих маркѐров,

то доля случаев превышения ДУ возрастает для КРР с 88,3% до 95,0%, а для РЖ – с 49,0%

до 69,0% и для НЯК – с 80,3% до 83,6%. Специфичность (относительно здоровых лиц)

при этом составляет 91,3% (табл. 14).

В соответствии с представленными данными, повышение хотя бы одного маркѐра из

пары, включает обследованного в группу риска и требует дообследования всего ЖКТ.

Таким образом, в настоящей работе доказана реальная возможность активного

выявления

группы риска наличия КРР и некоторых других клинически значимых

заболеваний ЖКТ с помощью относительно простых неинвазивных иммуноферментных

лабораторных методов, лишенных основных недостатков традиционного бензидинового

метода.

20

ВЫВОДЫ

1. Установлено,

что

по

диагностической

чувствительности

в

отношении

колоректального рака пять копро-тестов, выявляющих в кале человека

гемоглобин (количественный полуавтоматический тест - Q-FIT, количественный

автоматизированный метод – FOB Gold и качественный экспресс-тест - ЭТ),

комплекс гемоглобина с гаптоглобином (hHb/Hp) и опухолевую форму

пируваткиназы (fTuM2-PK) образуют следующий ряд: Q-FIT - 89,5%, hHb/Hp -

87,9%, fTuM2-PK - 79,2%, ЭТ - 78,3% и FOB Gold - 63,6%.

2. Все

исследованные

копро-тесты

обладают

сравнительно

высокой

специфичностью относительно здоровых лиц: Q-FIT – 95,3%, hHb/Hp – 97,6%,

fTuM2-PK - 94,7%, а FOB Gold и ЭТ – близкой ко 100%.

3. Диагностическая чувствительность количественного Q-FIT, выявляющего в кале

гемоглобин

человека,

составляет:

при

колоректальном

раке

-

89,5%,

неспецифическом язвенном колите - 79,0%, полипах кишки - 20,0%, раке

желудка - 51,2%, раке пищевода - 20,0%, что свидетельствует о возможности с

помощью этого теста выявлять случаи кровотечения, как из верхних, так и из

нижних отделов желудочно-кишечного тракта.

4. Установлено, что диагностическая чувствительность Q-FIT при разной степени

инвазии колоректального рака близка: Т1-2 - 95,0%, при Т3 - 88,2% и при Т4 -

90,9%, что позволяет заподозрить наличие злокачественного процесса в

кишечнике уже на начальной стадии его развития, но, вместе с тем, не исключает

присутствие других, клинически значимых заболеваний желудочно-кишечного

тракта.

5. Диагностическая чувствительность 2-х количественных тестов, выявляющих в

кале гемоглобин (Q-FIT) и комплекс гемоглобина с гаптоглобином (hHb/Hp)

близка

между

собой

для

колоректального

рака

(89,5%

vs

87,9%),

неспецифического язвенного колита (79,0% vs 71,9%), полипов кишки (20,0% vs

15,0%) и рака желудка (51,2% vs 43,8%), что, во-первых, свидетельствует о

взаимозаменяемости тестов, а во-вторых, не позволяет, как предполагалось

ранее, сравнивая данные, полученные с помощью этих двух тест-систем,

дифференцировать кровотечения из верхних и нижних отделов желудочно-

кишечного тракта.

6. Сочетанное исследование в кале 2-х маркѐров – hHb (тест-система Q-FIT) и

колоректального рака и других клинически значимых заболеваний желудочно-

кишечного

тракта,

требующих

дообследования,

обеспечивающее

fTuM2-PK адекватный подход для активного выявления групп риска наличия

21

диагностическую

чувствительность

при

колоректальном

раке

95,0%,

неспецифическом язвенном колите - 83,6%, раке желудка - 69,0%, если

положительным считать результат, при котором повышенным является хотя бы

один маркѐр из пары.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Для формирования группы риска наличия КРР и других клинически значимых

заболеваний ЖКТ (в частности, рака желудка, неспецифического язвенного колита,

полипов толстой кишки) целесообразно использование сочетания 2-х маркѐров,

выявляющих в кале гемоглобин (например, с помощью тест-системы Q-FIT, обладающей

наибольшей (из 3-х, изученных нами)) диагностической чувствительностью в отношении

скрытых

кровотечений)

и

опухолевой

формы

пируваткиназы

(fTu

M2-PK).

Положительный результат хотя бы одного из двух копро-тестов (hHb/ fTu M2-PK) требует

дообследования всего желудочно-кишечного тракта, т.к. эти маркѐры могут повышаться

при кровотечениях из разных отделов ЖКТ (в частности, при раке желудка и раке

пищевода).

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1.

Зенкина Е.В. Новые опухолеассоциированные копрологические маркеры

при колоректальном раке / Зенкина Е.В., Маршутина Н. В., Сергеева Н. С., Шелыгин Ю.

А., Солохина М.П., Парилова Н. К., Чернышов С. В. // VI Международная конференция

«Молекулярная медицина и биобезопасность», 10-11 ноября 2009, Москва, с. 154-155.

2.

Zenkina E.V. New fecal ELISA tests for Active Evaluation of Colorectal Cancer/

Sergeeva N.S., Zenkina E.V., Marshutina N.V., Solokhina M.P. // Tumor Biology.2009.

Vol.30.(Suppl.1). p. 53.

3.

Зенкина Е.В. Исследование диагностической чувствительности новых

опухолеассоциированных копрологических маркеров при колоректальном раке /

Чиссов В.И., Зенкина Е.В., Воробьѐв Г.И., Сергеева Н.С., Шелыгин Ю.А.,

Маршутина Н.В., Парилова Н.К., Чернышов С.В., Солохина М.П., Богданова Н.В.,

Вашакмадзе Л.А., Хомяков В.М., Сидоров Д.В., Когония Л.М. // Российский

4.

Зенкина

Е.В.

Исследование

диагностической

значимости

новых

иммуноферментных методов выявления гемоглобина человека, комплекса гемоглобина с

гаптоглобином и опухолевой пируваткиназой М2 типа в кале для колоректального рака /

Зенкина Е.В., Маршутина Н.В., Сергеева Н.С., Солохина М.П., Парилова Н.К., Чернышов

С.В. XVII // Российский национальный конгресс «Человек и лекарство», 12-16 апреля

2010, Москва, с.117.

5. E.V. Zenkina The study of new fecal ELISA tests for active evaluation of colorectal

cancer / N.S.Sergeeva E.V., Zenkina, N.V. Marshutina, M.P. Solokhina // Tumor Biology, 2010.

Vol.31, Sup.1., р. 104.

онкологический журнал. 2010. № 2. С.21-24.

22

6. Е.В. Зенкина Современные методы скрининга колоректального рака /

С.В.Чернышев,

Рыбаков, Ю.А.Шелыгин, В.И.Чиссов, Е.В. Зенкина, Н.В.Маршутина,

М.П.Солохина,

Н.С.Сергеева,

Н.Б.Захаржевская,

П.А.Костин,

Э.В.Генерозов

//Онкология. Том т.12, №2,

(Приложение «Перспективы

лечения

больных

колоректальным раком», II научно-практическая конференция с международным

участием, 17-18 июня 2010, Киев, с. 50-52.

7. Зенкина Е.В. Возможности новых иммуноферментных копро-тестов

при

колоректальном раке

и других

клинически значимых заболеваниях желудочно-

кишечного тракта / Зенкина Е.В., Сергеева Н.С., Маршутина Н.В. // XI Всероссийская

конференция

молодых

ученых

«Актуальные

вопросы

экспериментальной

и

онкологической онкологии». Онкохирургия. 2011.Т.3, №4, с.32.

8.

Зенкина

Е.В.

Эволюция

копро-тестов

в

активном

выявлении

колоректального рака // В.И. Чиссов, Н.С. Сергеева, Н.В. Маршутина // Российский

журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии, 2012, № 6, С. 44-52.

9. Зенкина Е.В. Иммуноферментные копро-тесты, выявляющие гемоглобин и его

комплекс с гаптоглобином при колоректальном раке и других клинически значимых

заболеваниях желудочно-кишечного тракта / Зенкина Е.В., Сергеева Н.С., Маршутина

Н.В., Солохина М.П. // VII-ая региональная конференция молодых ученых-онкологов. 27

апреля 2012, Томск, Приложение к «Сибирскому онкологическому журналу», с. 69-70.

10. Зенкина Е.В. Иммуноферментные тесты, выявляющие гемоглобин и его

комплекс с гаптоглобином в кале при колоректальном раке и других клинически

значимых заболеваниях желудочно-кишечного тракта / Сергеева Н.С., Зенкина Е.В.,

Маршутина Н.В., Хомяков В.М. // VIII Международный

клинический конгресс

«Прожектор гастроэнтерологии». Национальная Школа гастроэнтерологов, гепатологов

РГА. 6 октября 2012, Москва, с. 16.

11. Зенкина Е.В. Сравнение разных методов выявления скрытой крови в кале при

колоректальном раке / Н.С.Сергеева, Зенкина Е.В., Н.В.Маршутина // Вопросы онкологии.

Материалы VIII Всероссийского съезда онкологов «Онкология XXI века от научных

исследований в клиническую практику» 2013. 11-13 сентября, Санкт-Петербург. Том 59,

№3, приложение: том II, с. 583.

12. Зенкина Е.В. Различия в диагностической ценности ИФА тест-систем для

выявления скрытой крови в кале при колоректальном раке / Н.С.Сергеева, Е.В. Зенкина,

Н.В.Маршутина // Материалы

XVII

Российского онкологического конгресса, 12-14

ноября 2013, Москва, Злокачественные опухоли №2, с.137-138.

13.

Зенкина

Е.В.

Современные

представления

о

серологических

опухолеассоциированных

маркерах

и

их

месте

в

онкологии

Н.С.Сергеева,

Н.В.Маршутина, Солохина М.П., Алентов И.И., Зенкина Е.В., Парилова Н.К., Скачкова

Т.Е. / Успехи молекулярной онкологии, 2014, №1, с. 69-80.

14. Зенкина Е.В. Новые иммуноферментные тесты для выявления гемоглобина и

комплекса гемоглобина человека с гаптоглобином в кале при заболеваниях желудочно-

кишечного тракта // Сергеева Н.С., Зенкина Е.В., Маршутина Н.В., Парилова Н.К.,

23

Солохина М.П., Шелыгин Ю.А., Чернышев С.В., Веселов А.В., Хомяков В.М.,

Вашакмадзе Л.А., Сергеева В.С. Пособие для врачей, 2012, 16 с.



Похожие работы:

«ПЕРЕДЕЛЬСКИЙ Евгений Владимирович ЛЕЧЕНИЕ ТЯЖЕЛЫХ ФОРМ ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ У ЛИЦ МОЛОДОГО ВОЗРАСТА 14.01.09 – инфекционные болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Санкт-Петербург – 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном военном образовательном учреждении высшего профессионального образования Военномедицинская академия имени С. М. Кирова МО РФ Научный консультант: доктор медицинских наук...»

«Николаева Екатерина Владимировна ОЦЕНКА ЦЕНТРАЛЬНОЙ ГЕМОДИНАМИКИ У БОЛЬНЫХ РЕВМАТИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ C ЛЕГОЧНОЙ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИЕЙ Специальность 14.01.22 — Ревматология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва — 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном научном учреждении Научно-исследовательский институт ревматологии имени В. А. Насоновой. Научный руководитель: кандидат медицинских наук...»

«ФИЛИППОВА Ольга Васильевна ХИРУРГИЧЕСКИЕ И МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ЛЕЧЕНИЯ РУБЦОВЫХ ДЕФОРМАЦИЙ У ДЕТЕЙ 14.01.19 – детская хирургия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учѐной степени доктора медицинских наук Санкт-Петербург 2015 2 Работа выполнена в отделении последствий травм, ревматоидного артрита и комбустиологии Федерального государственного бюджетного учреждения Научно-исследовательский детский ортопедический институт имени Г.И. Турнера Министерства здравоохранения...»





 
© 2015 www.z-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.