авторефераты диссертаций www.z-pdf.ru
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
 

1

На правах рукописи

Труш Роман Викторович

ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

СКАЙ-ФОРСА И ЕГО ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИ

КОЛИБАКТЕРИОЗЕ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ

06.02.03 – ветеринарная

фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Троицк– 2015

2

Работа выполнена в ФГБОУ ВО «Белгородский государственный

аграрный университет имени В.Я. Горина» на кафедре морфологии и

физиологии.

Научный руководитель

доктор биологических наук, профессор

Горшков Григорий Иванович.

Официальные оппоненты: Староверов Сергей Александрович

доктор биологических наук,

ФГБУН Институт биохимии и

физиологии растений и микроорганизмов

Российской академии наук,

и.о. директора.

Бойко Татьяна Владимировна

доктор ветеринарных наук, доцент

ФГБОУ ВПО «Омский Государственный

Аграрный Университет имени

П.А. Столыпина», кафедра диагностики,

внутренних незаразных болезней,

фармакологии, хирургии и акушерства,

доцент

Ведущая организация: Федеральное государственное бюджетное

образовательное учреждение высшего профессионального образования

«Санкт-Петербургская

государственная

академия

ветеринарной

медицины».

Защита состоится «_____»_____________ 2015 г.

в «____»

часов

на заседании диссертационного совета Д 220.066.01 при ФГБОУ ВО

«Южно-Уральский ГАУ» по адресу ул. Гагарина,13,

г. Троицк,

Челябинской области, 457100.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВО «Южно-

Уральский ГАУ» и на сайте tvi_t@mail.ru.

Автореферат разослан

«_____»

________________ 2015 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

Борисенко Елена Валерьевна

3

1.ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДИССЕРТАЦИОННОЙ РАБОТЫ

Актуальность темы. Самая актуальная ветеринарная проблема в

птицеводстве, снижающая рентабельность животноводства РФ, это –

желудочно-кишечные и респираторные болезни

(А.Г. Шахов, 2008;

Ю.Н. Бригадиров,

М.А. Иванов, 2008). Для эффективного лечения

больных

животных

требуется применение химиотерапевтических

средств (ХТС) с широким спектром и разным механизмом действия на

возбудителей (М.И. Рабинович, Г.А. Ноздрин, И.М. Самородова, 2006;

В.И. Фисинин, 2009; С.В. Шабунин, Г.А. Востроилова, В.И. Беляев с

соавт., 2010; Г.А. Востроилова, В.И. Беляев, Л.Ю. Сашнина, 2011; А.

Г. Шахов, Л. Ю. Сашнина, Д. В. Федосов, 2012, и др.). При этом

важным направлением в химиотерапии является предотвращение или

замедление развития резистентности микроорганизмов, а также борьба с

уже сформировавшейся лекарственно-устойчивой микрофлорой (А.Г.

Шахов, Л.Ю. Сашнина, Г.А. Востроилова, В.В. Чернов, 2008).

Сложившийся

традиционный

способ

химиотерапии

путем

тотального насыщения организма

ХТС с точки зрения затрат на

препараты

расточителен и, кроме того, не отвечает врачебному

принципу «Не навреди лекарством», т.к. практически все средства

химиотерапии в рекомендуемых дозах дают те или иные осложнения. В

то же время снижение рекомендуемых доз недопустимо и чревато

потерей эффективности (М.И. Рабинович, 2006; Н.А. Лагункин, 2006; Б.

Ф. Бессарабов, 2009; Г.И. Горшков, С.Б. Носков, Е.Г. Яковлева, 2009;

И.С. Плитов, 2011).

Наноструктурная

форма ХТС имеет существенные преимущества

перед

традиционными лекарственными формами или их простыми

комбинациями большей эффективностью и возможностью сокращения

4

лечебных или профилактических доз, локальностью действия в очаге

поражения и скопления возбудителя, менее выраженным побочным

влиянием на организм животных (Б.М. Уша, А.А. Концевова, А.М.

Смирнов с соавт., 2012; В.Е. Романов, М.Б. Тарасов, И.П. Погорельский,

2013).

В НПО «НаноТехПром» (г. Белгород) с помощью нанотехнологий

созданы ХТС – пентациклин, эндосупер, скай-форс, рифомаст. Изучены

их физико-химические параметры (М.Б. Тарасов, 2006; М.Б. Тарасов,

Г.И. Горшков, 2010), доказано лечебное действие пентациклина при

желудочно-кишечных и респираторных заболеваниях у телят (Э.А.

Кравченко, Г.И. Горшков, А.Я. Хмельков, М.Б. Тарасов, 2011).

Препарат скай-форс никто не изучал, этому и посвящена данная работа.

Цель и задачи исследования. Цель исследования – изучить

фармако-токсикологические

свойства

скай-форса,

обосновать

безопасность

применения

и

определить

его

терапевтическую

эффективность при колибактериозе птиц.

По реализации этой цели были поставлены следующие задачи:

определить физико-химические свойства

наноструктурного

препарата скай-форса, установить идентификационные параметры;

изучить токсичность препарата скай-форс;

определить in vitro антимикробную активность препарата скай-

форса и изучить его влияние на ультраструктуру эшерихий;

установить сроки выведения остаточных количеств препарата из

организма цыплят-бройлеров;

обосновать оптимальную концентрацию ДВ в препарате;

определить

биохимические и

серологические показатели

сыворотки крови после применения препарата;

5

изучить

терапевтическую

эффективность

препарата

при

колибактериозе птиц, разработать схему лечебно-профилактических

мероприятий.

Научная новизна работы. Новый препарат скай-форс, испытанный

на

лабораторных животных и цыплятах не обладает острой

и

хронической токсичностью. В максимальных дозах не вызывает гибель

животных и изменений в печени, селезенке, тимусе и бурсы

Фабрициуса.

Впервые

примененный

в

условиях

крупнейшей

птицефабрики страны ЗАО «Приосколье», скай-форс показал высокую

эффективность при колибактериозе цыплят-бройлеров. Введение скай-

форса

в питьевую воду цыплят-бройлеров полностью подавлял

вспышку

колибактериоза,

а

эффективность

применения

с

профилактической целью не уступал антибиотикам (энрофлоксацину,

норфлоксацину гидрохлориду, диоксидину, доксициклину хихлату,

колистину сульфату, гентамицину сульфату).

Дано клинико-экспериментальное

обоснование применения скай-

форса в ветеринарной практике с целью лечения и профилактики

заболеваний цыплят-бройлеров. Проведена сравнительная оценка его

химиотерапевтической эффективности с другими ХТС. Сохранность

цыплят при использовании скай-форса составлял 96,72 и 98,15%.

Подана заявка на патент РФ на изобретение «Способ идентификации

водорастворимого

лекарственного

вещества

путем

сравнения

с

эталоном» №20131417702(063890) от 10.09.2013, МПК G 01 N21/33, G

01 N33/53.

Практическая значимость работы. Предлагаются оптимальные

дозы и способ применения скай-форса в условиях промышленного

выращивания цыплят-бройлеров. Препарат нетоксичен, и его можно

6

применять взамен антибиотиков для профилактики и лечения болезней

бактериальной этиологии с первых дней жизни цыплят.

Апробация

результатов

исследований.

Материалы

диссертационной работы были представлены на международных

научно-практических конференциях «Проблемы сельскохозяйственного

производства на современном этапе и пути их решения» (Белгород,

2012, 2014, 2015), Всероссийской научно-практической конференции

«Молодежь в аграрной науке и образовании – инновационный

потенциал будущего» (Новосибирск, 2013), международном конкурсе

молодежных проектов «Инновационный потенциал молодежи-2012»

(М., 2012),

15-м Московском

международном Салоне изобретений

инновационных

технологий

«Архимед

2012»

(М.,

2012),

на

расширенном

заседании

кафедр

морфологии

и

физиологии

и

инфекционной и инвазионной патологии БелГАУ (2014).

Основные положения, выносимые на защиту:

-физико-химические свойства наноструктурного препарата скай-форса;

-фармако-токсикологические свойства скай-форса;

-антимикробная активность препарата скай-форса и его влияние на

ультраструктуру эшерихий;

-терапевтическая эффективность препарата при колибактериозе птиц.

Публикации результатов исследования. Материалы диссертации

опубликованы в 8 научных статьях, из которых 4 помещены в изданиях,

включенных в Перечень ВАК.

Структура и объём диссертации. Диссертация представляет собой

рукопись компьютерного набора объёмом 133 страниц. В списке

использованной литературы 190 источников, в т.ч. 166 отечественных

7

авторов. Текст иллюстрирован 28 таблицами и 25 рисунками. Имеется

приложение.

2.МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнялась в период с 2010 по 2014 гг. на

цыплятах-

бройлерах в ЗАО «Приосколье» (откормочная площадка «Пятницкое-

2»), а также на лабораторных животных. В экспериментальной части

работы использовано 30 белых мышей, 1400 цыплят различных

возрастных

групп;

в

клинических

и

научно-производственных

испытаниях – 900000 цыплят-бройлеров кросса Hubbard F-15.

Первичное фармакологическое и токсикологическое исследования скай-

форса проводили согласно требованиям к доклиническому изучению

новых фармакологических веществ, а также с учётом имеющихся по

этому вопросу руководств (И. А. Кассирский, Г. А. Алексеев, 1970; Г.Н.

Першин, 1971; В.В. Гацура, 1974; Б. И. Антонов, 1989; М.Н. Аргунов,

2007). Острую токсичность препарата изучали при пероральном его

введении общепринятым методом (Г.Н. Першин, 1971). В опытах

использовали белых

мышей

и цыплят-бройлеров.

Хроническую

токсичность определяли на цыплятах-бройлерах.

Биохимические

исследования

крови

проводили

согласно

общепринятым методам. В сыворотке крови определяли содержание

общего белка и его фракции, сумму иммуноглобулинов, билирубин,

мочевину, содержание витаминов А, Е, С, каротина, кальция, фосфора,

цинка и йода, активность ферментов АлТ и AсT. Уровень фосфора

определяли

реакцией с аммония молибдатом в модификации

ИЭВСиДВ (В.Н. Афонюшкин, С.В. Леонов,

Ю.Г. Юшков, Е.В.

Дударева,

2005),

уровень

кальция

в

реакции

с

ортокрезолфталеинкомплексоном,

концентрацию

общего

белка

8

методом

Кингслея-Вейксельбаума,

альбумина

в

реакции

с

бромкрезоловым

зеленым,

концентрации

железа,

глюкозы,

триацилглицеролов,

холестерола

тестировали

с

использованием

стандартных тест-систем фирмы «Вектор-Бэст». Фотометрирование

реакционных смесей проводили на вертикальном спектрофотометре

«Tecan Sunrise».

В

работе

по

оценке

антимикробных

свойств

матричного

наноструктурного препарата скай-форса (В.Е. Романов, М.Б. Тарасов,

И.П. Погорельский, 2013) проводили методом серийных разведений,

при этом использовали следующие штаммы бактерий: кишечной

палочки – Е.соli С 6ОО, золотистого стафилококка – S. aureus АТСС

25178 - 1 и кишечного иерсиниоза – Y. еnterocolitica 1407. Бактерии

выращивали на бульоне и агаре Хоттингера при оптимальной

температуре. Изучение ультраструктуры бактерий Е.сoli С 600

проводили с помощью сканирующего электронного микроскопа JЕОL

JSМ

6510LV

(Япония).

Материалом

для

гистологических

исследований служили образцы внутренних органов цыплят-бройлеров,

отобранные в различные периоды опыта (тимус, сумка Фабрициуса,

печень, селезенка).

Серологические

исследования

крови

проводили

на

базе

Белгородской межобластной ветеринарной лаборатории, а также

в

лаборатории

ЗАО

«Приосколье»

с

помощью

ИФА

с

использованием тест-наборов производства компании «BioChek B.V.»

согласно

наставлениям к наборам диагностикумов. Кровь на

исследование от цыплят-бройлеров брали в 38 сут.

В качестве средства для лечения цыплят-бройлеров и профилактики

колибактериоза

испытывался

препарат

скай-форс

НПФ

9

«НаноТехПром». Диагноз на заболевание устанавливали комплексно, на

основании

клинического

обследования

цыплят-бройлеров,

лабораторных исследований и патолого-анатомического вскрытия.

Для клинических испытаний были созданы группы из цыплят-

бройлеров односуточного возраста. В каждых опытах выделяли

контрольную и опытную группы. В опытных группах применяли

перорально водный раствор скай-форса в дозе 25-100 мг/кг живой

массы цыпленка. В контрольной группе вводили препараты сравнения в

дозах и кратности согласно наставлению по их применению, такие как,

докси-10, гентамицин, диоксинор, карифлокс, гидроколистин, витроцил.

За птицей вели ежедневное клиническое наблюдение, учитывали общее

состояние, рост и развитее

массы тела, затраты корма на прирост,

падёж, сроки выздоровления.

Определение

сроков

выведения

остаточных

количеств

ДВ

препарата

скай-форса

проводили в

Белгородской

межобластной

ветеринарной лаборатории (ФГБУ «Белгородская МВЛ») и лаборатории

ЗАО «Приосколье». Препарат вводили цыплятам-бройлерам

(n=24)

внутрь вместе с водой в дозе 25; 300 и 375 мг/кг ж.м. с концентрацией

активного вещества 2; 4 и 6% в течение 5-8 суток. Отбор проб от

вынуждено убитых цыплят осуществляли через 4

и 24 часа после

начала применения препарата, а также

на 2; 3 и 4-е сутки после

последнего

приема

препарата.

Пробы

мяса

исследовали

на

хроматографе (Капель) методом капиллярного электрофореза и ВЭЖХ-

МС/МС. Статистический анализ цифровых показателей приведен

согласно описанию Г.Ф. Лакина (1973).

10

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1.Физико-химическая характеристика скай-форса. Препарат

скай-форс представляет собою мелкодисперсный порошок песочно-

красновато-оранжевого цвета, плотностью 1,52 г/см2. Легко растворим в

воде – насыщенный раствор в дистиллированной воде при температуре

20°С составляет 32%. Органолептические показатели: вкус – сладковато-

горький; запах – характерный, почти не ощущается. Легко смешивается

с водой и комбикормом. Результаты исследований в наших опытах

показывают, что исследования, проведенные методом ионометрии,

имеют однозначную зависимость показателя рН от концентрации

водного

раствора

скай-форса.

Титриметрический

метод

выявил

характерную для препарата

зависимость протекания во времени

реакции нейтрализации 0,5%-ным раствором NаОН. В течение шести

суток растворы оставались относительно стабильными.

Растворы скай-форса изучались также методом спектрофотометрии

в видимой и ультрафиолетовой областях спектра. Диапазон измерений

водного насыщенного раствора составил 220-920 нм; водного 2%-ного

раствора – 360-630 нм; раствора в метаноле – 200-359 нм. При

спектрофотометрическом исследовании раствора препарата в метаноле

погрешность

не превышала

1,09%.

При исследовании водного

насыщенного раствора препарата расхождений на основной частоте

поглощения не было, на второй частоте – 0,61%, на третьей – 1,84%.

При исследовании 2%-ного водного раствора на основной частоте

поглощения погрешность не превышала 1,36%, на второй – не более

0,35%.

11

3.2. Определение токсичности скай-форса.

Определение

острой

токсичности

на

белых

мышах.

При

наблюдении за белыми мышами (n=30) как в первые часы после

перорального введения скай-форса в дозах 25; 37,5; 50; 62,5 и 75 мг/кг

ж.м., так и в последующем не выявлено каких-либо изменений в их

общем состоянии. На протяжении всего времени наблюдения (14 сут)

мыши

были

подвижны,

адекватно

реагировали

на

внешние

раздражители,

активно

проявляли

исследовательский

рефлекс,

потребляли корм и воду, свободно перемещались. Заболеваний и

падежа не отмечено.

Изучение

острой

токсичности

на

цыплятах-бройлерах.

Испытывали дозы 20-70 мг/кг массы тела на цыплятах (n=35). После

введения скай-форса никаких клинически выраженных изменений у

цыплят даже от дозы 70 мг/кг не наблюдалось. За период опыта пал 1

цыпленок в последней группе с максимальной дозой. На вскрытии

павшего цыпленка выявлено кровоизлияние и отечность перикарда.

Другие органы были без визуальных изменений.

Изучение хронической токсичности на цыплятах. В этом опыте на

цыплятах (n=50) испытаны повышенные дозы скай-форса. После их

ежесуточного перорального введения (150-375 мг/кг), начиная с 14-

суточного возраста, также не наблюдалось никакой выраженной

реакции на препарат. Весь период наблюдения (22 сут) цыплята ничем

не

отличались

от

интактных

(по

поведению,

оперению,

общефизиологическим показателям, потреблению воды и корма).

Заболеваний и падежа не отмечено. Существенных изменений в темпах

роста не выявлено. Высокая переносимость препарата цыплятами

подтверждает нетоксичность наноструктурной формы скай-форса и

12

«родственных» ему других препаратов, испытанных исследователями

на телятах при желудочно-кишечных и респираторных заболеваниях

(Г.В. Сноз, Г.И. Горшков, Е.Г. Яковлева с соавт., 2010).

3.3. Гистоструктура иммунокомпетентных органов

При введении скай-форса цыплятам-бройлерам в максимальной дозе

(375 мг/кг ж.м.) гистоструктура внутренних органов (печени, тимуса,

селезенки, бурсы Фабрициуса) не отличалась от таковой у контрольных

животных.

На срезах печени цыплят всех возрастов встречались признаки

вакуолизации и белковой дистрофии. Также отмечались признаки

локального

лобулярного

инклюзионного

гепатита

(наличие

внутриядерных

телец-включений типа

Рубарта,

периваскулярные

инфильтраты, поражение клеток системы СМФ). Однако отличий по

частоте встречаемости и выраженности гистологических изменений

между птицей опытных и контрольных групп не обнаружено.

В возрасте 36 сут от дозы 375 мг/кг увеличивалось содержание

фибробластов по отношению к фиброцитам. Они располагались

интерстициально и по периферии центральных венул дольки. Однако

это не сопровождалось признаками нарушения микроциркуляции,

воспалительными

изменениями

и

иными

патогистологическими

признаками функциональной недостаточности органа.

Также обращает на себя внимание наличие деструктивных

изменений в микроциркуляторном русле мозговой зоны долек тимуса в

виде микротромбов в посткапиллярных венулах, лизиса эпителиальных

клеток тимуса, формирования участков амилоидоза и нарушения

формирования телец Гассаля (что может приводить к уменьшению

синтеза тималина, Т-активина и, соответственно, к иммуносупрессии).

13

Эти изменения отмечались преимущественно в возрасте 36, 29 суток и

затрагивали все опытные и контрольную группы.

3.4. Изучение противомикробного действия скай-форса

Антимикробные свойства скай-форса изучались не только на культуре

кишечной палочки (Е.соli С 6ОО), но и на золотистом стафилококке (S.

aureus АТСС 25178–1) и кишечных иерсиниях (Y. еnterocolitica 1407). В

опытах

in vitro, проведенных методом серийных разведений,

установлено,

что

МПК

скай-форса

для

этих

микроорганизмов

находилась на уровне 1мг·млˉ1, а бактериостатическая концентрация

равна 0,01мг·млˉ1. Ниже приведены фото воздействия скай-форса на

Е.coli.

б

Ув.50000

а Ув.50000

Рис.1. Исходные клетки кишечной палочки до (а) и после

внесение препарата (б)

На

приведенных

рисунках 1 и 2 видно, что в опытах in vitro

проявляется разрушающее влияние скай-форса на Е. coli С 600. Это

отмечалось после нанесения частиц препарата на поверхность плотной

питательной среды, засеянной кишечной палочкой. Вначале происходил

контакт частиц препарата с бактериальной клеткой, затем разрушалась

бактериальная стенка, и всё завершалось лизисом клеток через пять

б

Ув.50000

а Ув.50000

Рис.2. Разрушение клеточной стенки кишечной палочки

через 3 мин (а) и 5 мин (б).

3.5. Сравнение эффективности разных концентраций активных

веществ в скай-форсе

Одна группа цыплят (n=55807) получала препарат с содержанием

4% активного вещества, а другая (n=55707) – с 6%-ным содержанием.

Курс применения состоял в обеих группах из 3 периодов: 1-6-е сут, 18-

23-и и 28-35-е. Доза препарата 25 мг/ кг ж.м. цыпленка. Результаты

испытаний приведены в табл. 1. Из данных табл. 1 видно, что в группе,

где применялся препарат с содержанием активного вещества 4%,

сохранность выше на 1,64%, среднесуточный прирост массы тела – на

0,3 г, конверсия корма – на 0,057 кг, а там, где применялся 6%-ной

концентрации выше только показатель полученного мяса с м2 – на 0,52

кг. Следовательно, более предпочтительным оказался препарат 4%-ной

концентрации.

14

мин.

Основываясь на

приведенном фото,

можно

отметить, что

кластерные частицы препарата составляют размер от 5 до 10 нм.

15

Таблица 1. Результаты испытаний разных концентраций ДВ в скай-

форсе

4%

55807

95,72

54,8

1,835

46,42

287

37

1,05

6%

55707

97,36

55,1

1,778

45,90

301

37

1,05

Разница

1,64

0,3

- 0,057

- 0,52

14

Динамика массы тела цыплят-бройлеров. В опытном корпусе 16 в

7-суточном возрасте средняя масса цыпленка была выше, чем в 15-м

корпусе, но затем картина поменялась к 28 сут срока выращивания.

Происходила

как

бы

«компенсация»

за

отставание.

К

концу

выращивания различие в пользу 15-го корпуса составило всего 3 г.

Средние показатели к концу опыта практически не различались от

норматива для кросса.

3.6. Лечебная эффективность скай-форса

Первый опыт. Схема опыта: 1-я группа (контрольная) – корпус 22

(n=52331); 2-я группа (опытная) – 23 корпус (n=52331). В контрольной

группе цыплята получали следующие препараты: с 1-х по 6-е сут –

диоксинор и гентамицин, с 7-х по 11-е сут – докси-10, с 17-х по 22-е сут

– карифлокс, с 26 по 32-е сут – гидроколистин. В опытной группе –

скай-форс с 2%-ным содержанием активного вещества в дозе 25 мг/кг

ж.м. с 1-х по 6-е сут и с 20-х по 25-е. Динамика падежа представлена на

рис. 3 и 4. На приведенных рисунках видно, что в опытной группе

процент падежа не превышал от нормы для данного кросса на всем

16

протяжении выращивания, а в контроле падеж начался с 15-16 суток и

снизился лишь к 27 суткам.

Рис. 3. Сравнение падежа цыплят-бройлеров, получавших

скай-форс с «нормативным» для кросса падежом

Рис. 4. Сравнение падежа цыплят-бройлеров контрольной

группы с «нормативным» для кросса падежом

Результаты выращивания представлены в табл.2.

Таблица 2. Результаты испытания скай-форса с содержанием 2% ДВ

Группы

Контрольная

52331

60

38

92,85

1,786

47,77

297

Опытная

52331

58

38

96,72

1,750

48,42

307

Опытная

(n= 54317)

Контрольная

(n=54416)

98,15

60,2

1,77

51,10

334

38

1,2

98,98

57,5

1,76

49,58

328

38

1,4

Разница

-0,83

2,70

0,01

1,52

6

0

-0,2

Из таблицы 3 следует, что при одинаковом сроке выращивания

среднесуточный прирост в опытной группе больше, чем в контроле на

2,7 г, мяса с м2 получено больше на 1,52 кг, соответственно лучше

индекс продуктивности на 6 единиц. Существенным преимуществом

являются затраты на ветеринарные препараты. В опыте они равны 1,2

руб/гол, что ниже по сравнению с контролем на 0,2 руб/гол, или на 15%.

На финише средняя масса цыпленка составила 2299 г. Это – больше

контроля на 73 г, или на 3,2%.

Что можно объяснить снижением

бактериального «давления» на организм и выздоровлением цыплят.

17

Из данных табл. 2

видно, что сохранность в опыте составила

96,72%, что выше, чем в контроле на 3,87%, конверсия корма была

1,750 кг против 1,786 кг в контроле. Соответственно индекс

продуктивности в опыте выше на 10 единиц и составил 307.

Второй опыт. Опытная группа – 15-й корпус (n= 54317),

контрольная – 16-й корпус (n=54416). Схема применения скай-форса

(6%): в опытной группе – с 1-х по 6-е сут; с 18-х по 23-и сут и с 28-х по

35-е. Препарат применялся в дозе 25 мг/кг ж.м. В контрольной группе

цыплята

по той же схеме получали антибиотики витроцил,

доксициклин, карифлокс и гидроколистин.

Таблица 3. Результаты испытания скай-форса с 6% ДВ

Группы

18

3.7. Влияние скай-форса на серологические показатели и

напряженность иммунитета

Результаты

опыта показали наличие титров к таким инфекционным

болезням,

как ринотрахеит,

аденовирусная (FAV-1) и реовирусная

инфекции, что говорит о контакте птицы с антигеном (возбудителями

болезней). Показатель

титров для инфекционного

бронхита кур,

инфекционного бурсита кур имеет среднее значение, т.е. характерное

при применении вакцины против данных заболеваний. Не подтвердили

анализы наличия

инфекционной анемии

кур, орнитобактериоза,

сальмонеллеза и

микоплазмоза. Процент

защищенных к болезни

Ньюкасла в контроле равен 90% против 100% в опытной группе, и это

хороший

показатель,

который

обычно

является

следствием

регулярной и своевременной вакцинации птиц.

3.8. Динамика биохимических показателей сыворотки крови

Результаты исследования сыворотки крови от цыплят, получавших

скай-форс, представлены в табл. 4.

Проанализировав

биохимические

показатели

крови

цыплят-

бройлеров в возрасте 1-13 сут, можно утверждать, что эти показатели

отражают адаптацию организма после вывода. На этом этапе ЖКТ и

печень функционируют ещё недостаточно эффективно, в результате

чего

происходит

низкое усвоение азота

корма,

вследствие

катаболизма аминокислот в крови

появляется избыток мочевой

кислоты.

В возрасте 13 сут отмечалось повышение

концентрации

триацилглицеролов. Это может быть связано с тем, что в 10-суточном

возрасте происходила смена рациона.

19

Таблица 4. Биохимические параметры сыворотки крови цыплят-

бройлеров после применения скай-форса

1

18,2

4,2

10,00

0,246

190+

12,4

13,2

1,02

1,48

2,64

+1,1

+0,59

+0,97

+0,027

10,7

+0,5

+2,4

+0,03

+0,04

+0,11

13

20,5

7,68

1,5

0,380

513

13,4

24,9

1,25

2,19

4,31

+2,0

+1,16

+ 0,48

+0,053

+52

+0,8

+4,6

+1,26

+0,63

+0,97

19

27,3

11,00

3,47

0,131

198+

11,6

12,6

1,07

1,47

4,23

+1,5

+0,83

+0,27

+0,005

43,4

+0,1

+0,7

+0,03

+0,06

+0,11

30

34,0

16,75

3,6

0,219

178

8,05

25,5

0,98

2,21

3,33

+3,4

+0,54

+0,005

+0,005

+29

+1,6

+1,6

+0,04

+0,13

+0,09

35

14,8

2,99

0,159

297

9,78

21,9

0,94

2,46

8,98

+1,76

+0,10

+0,03

+23

+0,5

+1,6

+0,05

+0,06

+0,47

39

32,6

10,50

3,11

0,107

142

9,50

12,5

0,98

1,85

2,89

+1,2

+0,59

+0,17

+0,004

+20

+1,2

+2,6

+0,11

+0,06

+0,07

В 35-суточном возрасте на фоне снижения альбумина и резкого

подъема концентрации мочевой кислоты происходил

резкий подъем

концентрации фосфора, что может быть следствием

повышенной

нагрузки на почки. Анализ корреляции между фосфором и мочевой

кислотой показывает, что в объединенной выборке птицы в возрасте 30-

39 суток корреляция положительна (r=0,58). Это позволяет говорить об

общности процессов, затрагивающих обмен обоих веществ: например,

повышенный катаболизм белков (в т.ч. на фоне его избыточного

поступления с кормом) способен привести как к повышению уровня

фосфора в крови, так и к повышению мочевой кислоты. Следует

учитывать, что с 21-х сут содержание кальция в корме было снижено на

5,5%, а начиная с возраста 34 сут – еще на 5%, чем и объясняется

20

снижение его

уровня в сыворотке крови. При этом

нарушается

кальций-фосфорное соотношение в пользу фосфора.

Таким образом, все нарушения метаболизма можно соотнести с

изменениями состава рационов. Это подтверждает разнонаправленный

характер изменений содержания метаболитов в сыворотке крови птиц

разного возраста. К косвенным признакам отсутствия неблагоприятного

воздействия

скай-форса

следует

считать

отсутствие

каких-либо

нарушений метаболизма в период применения препарата.

3.9. Определение остаточных количеств препарата в тушках

цыплят-бройлеров. Проведенными исследованиями установлено, что

при выпаивании цыплятам препарата скай-форса в течении 5-8 суток с

концентрацией 4 и 6% наличие остаточных веществ левомицетина и

тетрациклина в пробах мяса не обнаружено как через 4 часа после

выпаивания, так и по истечении суток непрерывного применения

препарата.

После 2-суточного

ожидания количество метаболитов

левомицетина составило 25,05 и 36,03 нг/кг, тетрациклинов – 3,3 и 2,2

мкг/кг. Через 3 суток

ожидания

во всех пробах тушек цыплят-

бройлеров остаточных веществ левомицетина и тетрациклина не

обнаружено. После применения 2%-ной концентрации препарата в той

же дозе и продолжительности количество метаболитов левомицетина

после 2-суточного ожидания

составило 7,9 и 7,5 нг/кг, а наличие

тетрациклинов не обнаружено. После 3 и 4-суточного ожидания

остаточное количество метаболитов левомицетина и тетрациклина не

обнаружено. Полученные результаты позволяют прийти к следующим

выводам: а) мясо подопытных цыплят безопасно для использования в

пищу, т.к. содержание в нем антибиотиков намного ниже допустимого

уровня их остаточных количеств, даже при длительном применении

21

скай-форса (20 сут); б) связывать наличие остатков антибиотиков в

мясе с тем, что они входили в состав скай-форса не представляется

доказательным, поскольку такие малые количества их могло попасть в

организм цыплят случайно. Для обоснованного ответа на возможные

вопросы требуется проведение дополнительных экспериментов.

ВЫВОДЫ

1. В опытах на лабораторных животных и цыплятах бройлерах не

выявлена острая возможных максимальных доз скай-форса. Согласно

ГОСТ 12.1.007-76 скай-форс, по степени воздействия на организм

относится к 4 классу опасности - малоопасное вещество.

2. Скай-форс,

представляющий

собой

комплекс

химиотерапевтических средств, обладает выраженным антимикробным

действием в отношении возбудителя колибактериоза. По данным

электронной

микроскопии

культуры

эшерихий,

обработанной

препаратом, он оказывал деструктивное влияние на бактериальную

клетку. Антимикробное действие скай-форса для Escherichia coli,

Staphylococcus aureus и Y. enterocolitica составляет 1мг-мл-1, а

бактериостатическая концентрация равна 0,01мг-мл-1.

3. Пероральное введение скай-форса в течение 22 суток цыплятам-

бройлерам в дозах от 12,5 до 375 мг/кг ж.м. не вызывало видимых

изменений в клиническом состоянии, существенных нарушений

метаболизма в биохимическом составе крови и отклонений в

гистологической структуре органов и тканей (тимус, селезенка, печень,

клоакальная сумка).

4. Устойчивости возбудителя колибактериоза к препарату скай-

форс не наблюдалось. При курсовым применение скай-форса по 6-8

суток подряд с интервалом 7-10 сут, его химиотерапевтическая

22

эффективность при колибактериозе с каждым последующем курсом не

снижалась.

5. Применение препарата до, совместно или после проведения

вакцинации методом выпаивания вакцины против инфекционного

бронхита кур, болезни Ньюкасла и инфекционной бурсальной болезни,

не приводило к нарушению выработки иммунитета к данным

заболеваниям,

а

наоборот,

способствовало

выработке

антител.

Групповой иммунитет против болезни Ньюкасла достигал 95-100%.

6. Из испытанных вариантов доз и концентрации активного

вещества в скай-форсе более результативным был препарат 4%-ной

концентрации в дозе 25 мг/кг ж.м. Эта концентрация ДВ препарата

также

оказалась

самой

стабильной

по

физико-

химическим

характеристикам. Убой птицы разрешается не ранее, чем через 3 суток

после окончания применения препарата.

7. Применение препарата скай-форса цыплятам-бройлерам в дозе

25 мг/кг ж.м. 6-8 суток подряд в условиях производства обеспечивало

стабильные приросты их живой массы (от 55,1 до 60,2 г). Прекращение

его

применения

при

неполном

оздоровлении

поголовья

сопровождалось снижением приростов живой массы цыплят. При

повторном применении на том же поголовье положительное влияние

возобновлялось.

8. При производственных испытаниях на цыплятах-бройлерах в

ЗАО «Приосколье» терапевтическая эффективность препарата скай-

форс в дозе 25 мг/кг ж.м. 6-8 суток двумя и тремя курсами подряд,

составила соответственно 96,72 и 98,15%.

9. Применение скай-форса снизило затраты на ветеринарные

препараты на 15% и не вызывало изменения качества мяса цыплят-

23

бройлеров, продемонстрировав значительный ростостимулирующий

эффект (от 3,2% до 4,6%).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Скай-форс можно отнести к химиотерапевтическим препаратам

первого выбора при колибактериозе цыплят и рекомендовать его для

дальнейшего испытания как профилактическое и лечебное средство при

других болезнях бактериальной этиологии у цыплят-бройлеров.

2. Рекомендуемая терапевтическая доза – 25 мг/кг живой массы 1

раз в сутки тремя курсами по 6-8 сут; профилактическая доза – та же

6-8 сут подряд добавлять к питьевой воде. При повторных курсах

лечения (профилактики) эффективность не снижается.

3. Материалы исследований вошли в инструкцию по применению

препарата скай-форс.

СПИСОК

ОПУБЛИКОВАННЫХ

РАБОТ

ПО

ТЕМЕ

ДИССЕРТАЦИИ

а) в изданиях перечня ВАК

1.Труш Р.В. Изучение токсичности наноструктурного препарата скай-

форс/ Р.В. Труш, Г.И. Горшков// Ученые записки Казан. ГАВМ им. Н.Э.

Баумана. – Казань,2013. –Т.214. – С.440- 445

2.Труш Р.В. Биохимические характеристики сыворотки крови

у

цыплят-бройлеров при применении препарата скай-форс/ Р.В. Труш,

В.С. Черепушкина // Сибир. вестник с.-х. науки. – 2014. –№2. – С.53-59

3.Труш Р.В. Испытание эффективности нового препарата скай-форс при

выращивании цыплят-бройлеров/ Р.В. Труш, Г.И. Горшков// Сибир.

вестник с.-х. науки. – 2014. –№6. – С.71-76

4.Труш

Р.В.

Производственные

испытания

скай-форса

при

колибактериозе цыплят-бройлеров/ Р.В. Труш, Г.И. Горшков// Ученые

записки Казан. ГАВМ им. Н.Э. Баумана. – Казань, 2014. –С.219-222

24

б) в прочих изданиях

1.Труш

Р.В.

Производственные

испытания

экспериментального

ветеринарного препарата скай-форса/ Р.В. Труш // Мат-лы XVI

междунар. науч.-практич. конф. 14-16 мая 2012 года «Инновационные

пути развития АПК на современном этапе»/ БелГСХА им. В.Я. Горина.

– Белгород, 2012. – С.76

2.Труш

Р.В.

Изучение

динамики

изменения

биохимических

характеристик сыворотки крови у цыплят-бройлеров кросса ИЗА-

F15/Р.В. Труш, В.С. Черепушкина// Мат-лы конференции 20-21

сентября 2013 года «Молодежь в аграрной науке и образовании –

инновационный потенциал будущего»/Новосиб. гос. аграр. ун-т. –

Новосибирск, 2013.-С.139-143

3.Труш Р.В. Влияние наноструктурного препарата скай-форс на

динамику живой массы и среднесуточные приросты / Р.В. Труш, Г.И.

Горшков // Мат-лы XVIII междунар. науч.-практич. конф. 26-27 мая

2014 года «Инновационные пути развития АПК на современном этапе»/

БелГСХА им. В.Я. Горина. – Белгород, 2014. – С.79

4.Труш Р.В. Гистоструктура печени и иммунокомпетентных органов у

цыплят, получавших скай-форс/ Р.В. Труш, Г.И. Горшков // Мат-лы

XVIII

междунар.

науч.-практич.

конф.

26-27

мая

2014

года

«Инновационные пути развития АПК на современном этапе»/ БелГСХА

им. В.Я. Горина. – Белгород, 2014. – С.81



Похожие работы:

«Суворов Михаил Андреевич МЕХАНИЗМЫ И АГЕНТЫ МАНИПУЛЯЦИИ РЕЛИГИОЗНЫМ СОЗНАНИЕМ В СОВРЕМЕННОМ РОССИЙСКОМ ОБЩЕСТВЕ Специальность 09.00.14 – Философия религии и религиоведение (философские науки) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата философских наук Чита – 2015 доктор философских наук, доцент Бернюкевич Татьяна Владимировна Зайцев Павел Леонидович, доктор философских наук, доцент, Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего...»

«Нуртдинова Лариса Альвертовна Лазерная генерация на кристаллах LiYXLu1-XF4:RE (RE=Ce,Yb; x=0.1) с применением принципов управления фотодинамическими процессами 01.04.05 – оптика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук Казань – 2015 Работа выполнена на кафедре квантовой электроники и радиоспектроскопии ФГАОУ ВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет Научный руководитель: Тагиров Мурат Салихович, доктор...»

«ТАРЕНИК ЮЛИЯ МИХАЙЛОВНА ВЛИЯНИЕ АГРОТЕХНИЧЕСКИХ И ХИМИЧЕСКИХ ПРИЕМОВ БОРЬБЫ С СОРНЯКАМИ НА ПРОДУКТИВНОСТЬ ЯРОВОЙ ПШЕНИЦЫ В ЗВЕНЕ ЗЕРНОПАРОВОГО СЕВООБОРОТА В ПРИОБСКОЙ ЗОНЕ АЛТАЙСКОГО КРАЯ Специальность: 06.01.01 – Общее земледелие, растениеводство АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Красноярск, 2015 профессор Петрович Часовских Владимир Официальные оппоненты: Стецов Григорий Яковлевич, доктор сельскохозяйственных наук,...»





 
© 2015 www.z-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.